传统肿瘤分子诊断技术，需要通过手术或穿刺获取组织样本，具有对病人产生创伤、无法进行动态监测等局限性。荣登MIT Technology Review 2015年度十大突破技术榜单的液体活检技术，逐渐从科学研究走向了临床诊断，在肿瘤诊断及治疗中大放异彩。
“液体活检”从血浆为代表的体液样本获得游离核酸或细胞，进而应用于肿瘤早期诊断、靶向药物的选择以及动态疗效监测等。得益于科学研究的深入和测序技术的发展，我们对血液的了解越来越深入，可得到的信息也更多。
到底是血液里的何种成分让我们可以获取更多的信息，这些信息会对临床又有怎样的帮助？在本文中，液体活检革命的领导者QIAGEN将带您各个击破。
ctDNA——蛛丝马迹
ctDNA（circulating tumor DNA，循环肿瘤DNA）是cfDNA（cell-free DNA）的一种，一般来源于凋亡裂解的细胞。肿瘤细胞破裂释放到血液中的游离DNA，就是ctDNA。
多个研究表明，ctDNA的浓度与肿瘤进展高度相关，因此我们可通过ctDNA来进行肿瘤分期、预后评估、以及动态耐药监测。它所携带的肿瘤基因组信息可用于用药指导，不仅取样简单，还能克服肿瘤组织在时间和空间上的异质性，展示更全面的信息。QIAGEN作为样本制备与检测的全球领先者，为您提供完整的ctDNA提取与检测方案。
游离核酸提取试剂盒——工欲善其事，必先利其器。ctDNA多为小片段核酸，在外周血中的含量相当低，如何对其进行有效提取，是广大用户关注的问题。QIAGEN的QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit是游离核酸提取的得力工具，可达到250倍浓缩，此外还有采用全自动磁珠法的QIAsymphony Circulating Nucleic Acid Kit为后续检测保驾护航。
QIAGEN therascreen EGFR RGQ PCR Kit——世界首个CE-IVD认证的液体活检EGFR突变检测试剂盒，用于非小细胞肺癌患者吉非替尼（易瑞沙）伴随诊断治疗，通过IFUM（易瑞沙后续评估）大型伴随诊断研究，在652例患者中血液与配对组织EGFR突变状态的一致性达到94.3%，并使得15–20%无法获取肿瘤组织样本的病人从血液检测中获得靶向治疗机会。
GeneReader二代测序解决方案——目前全自动二代测序系统GeneReader NGS System应用范围包括凯杰全新的Actionable Insights Tumor Panel，可检测12个与乳腺癌、卵巢癌、结直肠癌、肺癌和黑色素瘤等癌症相关的基因，涵盖多达1,250个基因突变，探索更深层次的肿瘤信息，将为QIAGEN液体活检方案带来新的突破。
CTC——邪恶排头兵
随着实体肿瘤的生长，在周围微环境发生了特定的变化时，一部分肿瘤细胞将获得异常的活动能力（上皮间质转化，EMT）。这些细胞如同邪恶的尖兵，从原发肿瘤上脱落，在身体里寻找新的落脚点。搭乘血液快线的脱落肿瘤细胞被称为循环肿瘤细胞（CTC， Circulating Tumor Cells）。
目前，CTC的计数可用于判断预后以及复发检测；对CTC进行单细胞测序，可指导肿瘤用药、掌握癌症的动态变化，及时调整治疗方案；从血液中分离出来的活体CTC，还可进行进一步培养，用于构建肿瘤研究模型等。
QIAGEN 的单细胞全基因组/ 全转录组扩增方案让您轻松跨过样本量低的限制，帮您深度解析CTC内隐藏的信息：
- REPLI-g Single Cell Kit：采用改良的MDA技术对单个细胞进行全基因组无偏差扩增，高度适合NGS分析
- REPLI-g WTA Single Cell Kit：用于对从单个细胞中得到的RNA或mRNA进行无偏差的全转录组扩增
- REPLI-g Cell WGA & WTA Kit：用于对少量细胞同时进行全基因组/全转录组扩增
Exosome——特战小分队
除了CTC和ctDNA，exosome（外泌体）是液体活检的新贵。外泌体是细胞分泌出的囊泡，包含的内容有蛋白质、DNA、信使RNA以及非编码RNA，是细胞间沟通的载体。研究发现，肿瘤细胞释放的外泌体的量较大，这些外泌体与肿瘤的发生、发展、转移以及抗药性有关。肿瘤细胞以外泌体为载体，迷惑免疫系统，从而逃过免疫系统的监视。外泌体不仅是通讯兵，也是工兵连，给肿瘤细胞的转移指引方向的同时，也创造适合肿瘤生长的微环境。
外泌体携带的信息多样化，其中的蛋白质和核酸，均可用于癌症的早诊、复发监测、抗药性监测等相关方面的分析。且外泌体在数量上多于CTC，更易富集；在形式上，分泌小泡能够有效保护核酸类物质，克服了ctDNA在血液中容易降解的问题，在临床应用上大有可为。
QIAGEN的exoRNeasy Serum/Plasma Kits采用Exosome Diagnostics, Inc.公司的技术，取代了传统的超速离心进行exosome分离的方法，通过离心柱和特制缓冲液，快速从血清/血浆中分离exosomes，之后使用QIAGEN特有的高效技术分离包含miRNA在内的总RNA。整个实验流程，从血清/血浆样本到RNA产物，只需1小时。
到此，我们带您熟悉了液体活检的三个检测物：CTC循环肿瘤细胞、ctDNA循环肿瘤DNA和Exosome。请持续关注我们，了解在液体活检领域还有哪些值得期待的技术。
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