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  • Cell :ENTPD5可以作为一种抗肿瘤的新靶标

    来自美国得克萨斯大学西南医学中心等处的研究人员证明了一种PI3K/PTEN调控环路中的新成分,并提出这种成分可以作为一种抗肿瘤的新靶标。 PTEN是一种重要的具有磷酸酶活性的信号因子,PI3K/PTEN信号通路作用广泛,能调节一系列基本的细胞反应。PTEN基因可通过基因突变、DN
    2010/12/01
  • 羟自由基激活的钾离子通道参与胁迫诱导的细胞凋亡

    Conflux + I&E Flux + I&M Flux = 细胞内外离子/分子同时检测完整方案 羟自由基激活的K+外流参与细胞凋亡 羟自由基激活的钾离子通道参与胁迫诱导的细胞凋亡 图注:活性氧诱导拟南芥根部K+外流 A:1mM Cu/a处理后伸长区K+外流图; B:
    2010/04/29
  • 基因组DNA的提取(有机溶剂提取法和Chelex-100提取法)

    生物性检材的DNA 分离是DNA 分型的第一步,是保证后期实验成功与否的关键环节。 DNA 存在于细胞内,首先利用各种方法(高渗或低渗法)破坏细胞的完整结构,通过离心收集细胞核,在蛋白酶K、SDS 作用下,消化破裂细胞膜与核膜,核蛋白变性并降解,使 DNA 从核蛋白中游离出来,然
    2010/04/03
  • Southern Blot 实验流程(包括原理/细节)

    一、DNA 的提取 人和哺乳动物细胞基因组DNA的分离通常是在有EDTA、Sarkosye等一类去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞,随后用酚、氯仿抽提,经RNase 处理和纯化来提取DNA。 (1)取单层细胞,经无钙、镁PBS洗一次,用0.25%胰蛋白酶消化,细胞悬液经PBS洗
    2010/03/25
  • 基因组DNA——饱和氯化钠法提取外周血DNA

    【实验目的】 学习从外周血中提取基因组DNA 的方法。 【实验原理】 以蛋白酶K 和SDS 裂解细胞释放DNA,而DNA 在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高,Na+与带负电的DNA 结合成DNA 钠盐,这时DNA 在溶液中呈溶解状态。以氯仿抽提DNA,去除溶液中蛋白杂质后
    2010/03/19
  • 胡杨细胞在盐胁迫下与K+/Na+调控相关的信号通路研究

    近日,北京林业大学生物科学与技术学院陈少良实验室利用“非损伤微测技术”取得的科研成果在《Plant, Cell & Environment》(2008 IF 4.666)杂志发表。这项成果将非损伤微测技术与激光共聚焦、X射线微量分析等技术相结合,研究了胡杨细胞在盐胁迫下与K+/N
    2010/03/17
  • 小鼠肝基因组DNA制备

    原理 DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中,制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。 蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶,其重要特性是能在 SDS 和 ED
    2010/03/11
  • 细菌基因组DNA的微量提取法

    本方法通过SDS裂解细胞,蛋白酶降解蛋白,CTAB去除多糖成分 一:仪器:同方法一 二:试剂: TE、TAE缓冲液;10%SDS;5MNaCL; 20mg/ml蛋白酶K;CTAB/NaCL溶液(10% CTAB,0.7M NaCL 4.1gNaCL 溶于80ml水中,缓
    2010/03/11
  • 凋亡细胞DNA片断提取操作步骤

    细胞DNA的提取: (1)消化细胞后以1500r/min离心,去上清后重悬于冰冷的1×TBS中,再次离心加入0.5ml提取缓冲溶液(RNA酶临时加入),移入 EP管中。 (2)37℃孵育1h,加4μl蛋白酶K/ml,50℃孵育3h。 (3)加入0.5ml酚/氯仿(1:1 V
    2010/03/09
  • 动物基因组DNA的提取

    [实验原理] 在EDTA和SDS等去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提,可以得到哺乳动构基因组DNA,用此方法得到的DNA 长度为100-150 kb,适用于L嘴菌体构建基因组文库和 Southern分析。 通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤,以及相对
    2010/03/07
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