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  • 总DNA质量检测及酶切

    实验目的: 了解掌握检测 DNA 质量的方法以及 DNA 定量的方法;了解影响 DNA 在琼脂凝胶中泳动速率的因素;训练 DNA 的琼脂凝胶电泳操作及 DNA 的限制性内切酶操作。 实验原理: 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近
    2010/03/20
  • 目的DNA片段的回收及纯化

    【实验目的】 掌握从琼脂凝胶中回收纯化目的DNA 片段的方法。 【实验原理】 在NaI 存在的条件下,融化含有DNA 片段的凝胶块,使DNA 片段吸附于硅胶树脂上,最后用TE 缓冲液溶出DNA。 【实验仪器】 1.台式高速离心机 2.水浴锅 3.电泳仪及水平电泳
    2010/03/19
  • 鸡基因组的PCR-RFLP分析

    一、实验方法 1、鸡基因组DNA的提取 2、目的基因的PCR扩增 3、内切酶消化PCR产物 4、琼脂凝胶电泳(检测基因型) 鸡DNA的获取 1、鸡翅下静脉采集全血;2%EDTA抗凝; 2、DNA提取: 裂解细胞核(红细胞+白细胞) ↓ 酚-氯仿去除蛋白质
    2010/03/15
  • DNA的琼脂凝胶电泳实验原理和操作步骤

    一、实验目的 琼脂凝胶电泳是常用的检测核酸的方法,具有操作方便、经济快速等优点。本实验学习DNA琼脂凝胶电泳的使用技术,掌握有关的技术和识读电泳图谱的方法。 二、实验原理 琼脂凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持
    2010/03/12
  • DNA琼脂凝胶电泳原理和操作

    【原理】 DNA的电泳原理与蛋白质电泳基本相同。在pH高于其pI时,DNA分子带负电荷。在直流电场中DNA向正极泳动。不同的DNA分子因电荷数、构象和分子量大小的不同,在同一电泳系统中的泳动速度有差异,达到分离的目的。电泳后的凝胶浸泡于溴化乙锭染料中,溴化乙锭分子与DNA分子结
    2010/03/12
  • 从普通琼脂凝胶电泳中用玻璃奶回收DNA段

    实验步骤: 1、待回收的DNA段经电泳分离后,从琼脂凝胶上切下所需DNA段,放在1.5ml EP管中; 2、加入3 倍(请准确估量凝胶的体积)体积的溶胶液(以100μl 体积胶加入300μl 溶胶液为一次标准反应),室温下放置5分钟或50℃ 保温3分钟,其间轻摇EP管几次使
    2010/03/11
  • 细菌总DNA的提取和鉴定

    【目的和要求】 1.学会CTAB法提取细菌总DNA。 2.掌握DNA的琼脂凝胶电泳法。 【实验原理】 DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的,因此提取出脱氧核核蛋白复合物后,必须将其中蛋白质去除。CTAB(溴代十六烷基三甲胺)是一种去污剂,它能与核酸形成复合
    2010/03/11
  • 回收酶切产物操作步骤

    1、将已经电泳确定的可回收的酶切产物在合适浓度的回收用琼脂凝胶进行电泳。最好换用新的电泳缓冲液10 × TAE(10 ×Tris-乙酸)。 2、当溴酚蓝迁移至足够距离时(至少2 cm以上),在长波紫外灯下观察,用清洗过的刀片在目的片段前切下与目的片段同长,宽度适当(一般2 c
    2010/03/10
  • 细菌总DNA(total DNA, genomic DNA)提取和凝胶电泳检测

    基本概念: 总DNA(total DNA, genomic DNA)凝胶电泳 [实验目的] 1.学习细菌总DNA提取的原理和方法 2. 学习琼脂凝胶电泳方法 [实验材料] 1.菌种 自己分离纯化后的细菌菌株 2.试剂 TE、溶菌酶溶液(20mg/ml)、10%
    2010/03/09
  • 电泳、转膜

    转膜是把DNA 从琼脂凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定,是进行各种后续研究(如 RFLP 分析,阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。 实验目的: 掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤 实验原理: 1.转膜的方式: 向上
    2010/03/08