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  • Southern 杂交技术

    Southern技术是指以Southern名字命名的DNA转移杂交技术。它可用于基因组特定DNA序列的定位,可以测定相关片段的同源性、可以从c库、基因组文库中筛选完整基因等。用一种或多种限制性内切酶对基因组DNA加以切割,通过琼脂凝胶电泳分离酶切片段,随后,使DNA在原位变性,
    2010/04/15
  • 琼脂凝胶电泳法分离LDH同工酶及血清LDH总活力的测定

    一、目的: 1.学习琼脂聚胶电泳的原理和方法; 2.学习酶专一性染色原理及其应用; 3.掌握分离LDH同工酶的方法; 4.学习测定血清LDH总活力的原理与方法。 二、原理: 能催化同一反应而蛋白质结构不同的酶,称为同工酶。同工酶的蛋白结构既然有差别,它们的理化性质也
    2010/04/10
  • 核酸凝胶电泳观察法

    实验原理:琼脂是海藻中提取的线状高聚物,不同浓度的琼脂密度不同,一般PCR产物使用2%浓度,0.5Kb-10Kb的DNA使用1%浓度,基因组DNA使用0.3%-0.7%浓度;不同大小的核酸在同一浓度的凝胶中迁移率不同,因为分子越大其受琼脂的阻力越大,迁移率与碱基对的对数值成
    2010/04/10
  • 核酸蛋白转移电泳及杂交

    一、DNA Southern Blot及杂交 本技术可用于基因组DNA特定序列定位,尤其可分析某些基因的限制性内切酶长度多态性,对遗传性疾病的早期基因诊断、产前诊断或基因变异等方面的研究有应用价值,其过程包括:样品DNA内切酶水解、水解片断的琼脂凝胶电泳分离、分离后水解片断的
    2010/04/08
  • 琼脂凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)检测DNA

    原理: 琼脂是从海藻中提取出来的一种线状高聚物,可作为电泳支持物,适用于分离大小范围在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离,与标准DNA片段进行对照,就可获知该样品分子量大小。在质粒抽提过程中,由于各种因素的影响,使质粒DN
    2010/04/08
  • 水平式琼脂凝胶电泳法检测DNA

    实验目的 学习水平式琼脂凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。 实验原理 闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同,在加溴化乙锭的琼脂凝胶电泳上呈现不同的迁移率,因而在紫外灯下观察,能区别闭合环状质粒 DNA(cccDNA)、线性质粒DNA(L-D
    2010/04/08
  • 质粒DNA的抽提、沉淀及琼脂凝胶电泳

    一、实验目的 ·学习酚、氯仿抽提去除蛋白质的基本方法 ·了解质粒DNA的抽提方法 ·学习掌握琼脂凝胶电泳的方法 ·熟练取液枪的使用方法 二、实验原理 ·在DNA的粗提液或其他的DNA反应体系中,一般都混有蛋白质、寡苷酸等杂质。酚和氯仿可以使蛋白质变性,离心后变性蛋
    2010/04/06
  • 乳酸脱氢酶同工酶的分离(琼脂凝胶电泳法)

    一 原理: 来源于同一个体或组织,能催化同一反应,而蛋白结构不同的酶称为同工酶。   同工酶的蛋白结构有差别,它们的理化性质也就有所差异。因此可用电泳或其它方法将它们分离开来。例如乳酸脱氢酶(LDH)同工酶,它们都能催化乳酸脱氢产生丙酮酸,但经电泳法分离后,就有5个同工酶区带
    2010/03/29
  • DNA琼脂凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)分析

    一、原理 琼脂凝胶具有分子筛效应。在中性ppH值的电泳缓冲液体系中,DNA分子由于带负电荷,所以在电场作用下由负极向正极泳动。由于DNA分子的大小和构型不同,在相同的时间内迁移至不同的位置。凝胶经溴化乙锭染色后,紫外检测仪下观察,即可看见DNA片段按大小不同呈条带分布。由于在
    2010/03/29
  • DNA的凝胶电泳(gel electrophoresis)

    一、原理 琼脂或聚丙烯酰胺凝胶是分离和纯化DNA片段的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离小分子的核酸;琼脂凝胶孔径较大,被应用于大分子核酸的分离和纯化。在一定浓度的琼脂凝胶介质中,DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶(EB
    2010/03/29