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  • 三种修复抗原方法之比较

    免疫组化染色的实质是抗原抗体反应,即用特异性抗体识别组织和细胞中的相应抗原,不少医药研发公司提供免疫组化染色服务。然而由于现在使用广泛的病理标本固定甲醛能够形成醛键和羧甲基并且能够使蛋白发生交联而封闭抗原决定簇,从而影响染色结果。因此免疫
    2018/11/14
  • 酶标板分类

    ...为较易产生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需使用蛋白作为封闭剂。 (2) 中结合力 此类酶标板经表面疏水键被动与蛋白结合,适合作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200~300ng IgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大...
    2013/11/05
  • 酶标板: ELISA实验不可忽视的小细节

    ...为较易产生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需使用蛋白作为封闭剂。(2) 中结合力此类酶标板经表面疏水键被动与蛋白结合,适合作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200~300ng IgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结...
    2013/09/02
  • 竹节虫的自卫术

    ...泽克(Leslie Biesecker)说:“这个例子非常特殊,因为他们服务的对象是一个封闭的社区。”这里所谓的“封闭”(closed)是指该社区始祖人口很小并且他们只在族内联姻。所以这些“朴素的人”遗传的罕见疾病的种类较少。尽管得承认在阿米什和门诺社区中较容易筛选出致病基因,但是斯特劳斯认为,...
    2013/04/11
  • 推荐生物实验室日常小技巧集锦

    ...夜,酶切很好。3. 做WESTERN BLOT 的时候,大家往往会摸索一抗、二抗的浓度,封闭时间,曝光时间等等,而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜,甚至重新提蛋白,这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后,将PVDF膜晾干,裁减成小块,保存起来,用的时候取出一块,没有...
    2013/03/21
  • 直接原位PCR实验操作

    ...配置 缓冲C:0.1 mol/L Tris-HCl (pH7.5),0.1 mol/LNaCl,2 mmol/L MgCl2, 0.5% Triton-X100 封闭:3%BSA(溶于缓冲C中) 显色:0.05%DAB,溶于0.05 mol/L Tris-HCl (pH7.4),临用前每10 ml加30%过氧化氢50 μl。 1%盐酸酒精 苏木素染色 2. 操作方法 (1) 用30 μl 3%BSA滴加在玻片上,封闭1 h; (2)用缓冲C简洗1 min,每片...
    2013/03/07
  • 直接点样的芯片制备技术

    ...固定蛋白质的目的。通常情况下,点样后处理包括水合、紫外交联、洗脱和封闭4个步骤。水合的目的是保证样品与基片表面在溶状态下充分反应;紫外交联的目的则是希望样品与基片表面形成的化学键能够吸收紫外线而变得更加牢固;洗脱的目的是为了洗掉那些没有牢固结合的样品,以消除其在杂交...
    2013/02/04
  • 酶免疫细胞化学染色操作指南

    一、材料和试剂 1、玻片:须用免疫组化专用玻片,或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。 2、5-10%正常山羊血清封闭,用PBS配。 3、3%牛血清白蛋白(BSA),用PBS配。 4、0.01M pH7.4 PBS 5、1% BSA-PBS(含0.05% Tween20)
    2010/05/05
  • 免疫组化染色方法(SP法和SABC法)

    SP法 1)脱蜡、水化; 2)PBS洗2~3次各5分钟; 3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室温静置10分钟; 4)PBS洗2~3次各5分钟; 5)抗原修复; 6)PBS洗2~3次各5分钟; 7)滴加正常山羊血清封闭,室温20分钟。甩去多余体。 8)
    2010/04/14
  • 凋亡相关基因-Bax的表达产物的检测

    操作: 1、 培养细胞(96孔板,每组3正常、3损伤、3损伤恢复) 2、 PBS洗,5min X 3次 (小心) 3、 甲醇固定10min 4、 PBS洗,5min X 3次 5、 加入封闭(1:10) 25µl,37 ℃,30min,吸去上清,滤纸吸干 6、 加
    2010/02/24