MAg25K-IDA-Ni(Ni IDA琼脂糖磁珠)说明
生物探索 · 2018/01/09
Ni IDA琼脂糖磁珠结合载量高、非特异性吸附低。针对细菌,酵母,昆虫和哺乳动物细胞等分泌或胞内表达的组氨酸标签蛋白。

       Enriching Beads®Ni IDA琼脂糖磁珠是专为组氨酸标签(His-tag)蛋白纯化而设计的新型功能化材料。与传统的金属螯合琼脂糖或者葡聚糖预装柱相比,Ni IDA琼脂糖磁珠具有顺磁性,借助外加磁场易实现目标蛋白的分离与纯化;操作简单,一步纯化即可获得高纯度的组氨酸标签蛋白;可通过洗脱液体积控制目标蛋白浓度,方便后续的样品处理,Ni磁珠可简单再生、重复使用。Ni IDA琼脂糖磁珠适合原核细胞(如大肠杆菌)表达的可溶性组氨酸标签蛋白的纯化。

       Enriching Beads®Ni IDA琼脂糖磁珠结合载量高、非特异性吸附低。针对细菌,酵母,昆虫和哺乳动物细胞等分泌或胞内表达的组氨酸标签蛋白。


【备注信息】

1.磁珠与蛋白结合量与目标蛋白特性有关,此处仅作参考值;

2.固形物浓度10% (v/v)是指1mL磁珠悬浮液中包含100µL体积的磁珠;

3.产品可配合英芮诚ETP-32型核酸提取仪实现高通量工作;

4.磁珠使用和保存过程中应避免反复冻融,且不可以干燥;

5.用户可进一步检测经Ni IDA琼脂糖磁珠纯化、磁场分离后的组氨酸标签蛋白上清液,优化蛋白纯化流程;

6.本产品可重复使用8~10次,当纯化性能降低时,建议进行再生处理;

7.使用过的磁珠重复使用时,建议纯化同种蛋白,纯化不同种类蛋白时,建议使用新的磁珠。



【Ni IDA琼脂糖磁珠再生】

       Ni IDA琼脂糖磁珠连续使用8~10次后,结合目标蛋白的能力可能会明显降低,建议进行磁珠再生处理,Ni IDA琼脂糖磁珠的再生需要先自行配置下列缓冲液:

   Stripping Buffer:50mM Tris-HCl、150mM EDTA的PBS溶液,pH=7.2~7.6;

   Beads Wash Buffer:0.5M NaOH,2M NaCl,去离子水溶液;

   Recharge Buffer:100~200mM NiSO4溶液;

   Storage Buffer:20%(v/v)乙醇。

1.将Ni IDA琼脂糖磁珠悬浮液磁性分离去除上清液;

2.加入1mL Stripping Buffer,充分混匀磁珠,室温旋转混合10min,磁性分离去除上清液,重复此步骤1次;

3.加入1mL去离子水,充分混匀磁珠,磁性分离去除上清液;

4.加入1mL Beads Wash Buffer, 充分混匀磁珠,室温旋转混合10min,磁性分离去除上清液,去离子水重复洗涤3~5次,至洗涤液呈中性为止;

5.加入1mL Recharge Buffer,充分混匀磁珠,室温旋转混合30~60 min;磁性分离去除上清液,去离子水重复洗涤5次以上,磁珠再生完毕。

      注:以上再生的磁珠可直接用于His标签蛋白的纯化,或分散于超纯水中短期保存,长期保存建议分散到20%(v/v)乙醇溶液,置于2~8℃保存。


更多信息请收听“英芮诚小萌新~”







查看更多
发表评论 我在frontend\modules\comment\widgets\views\文件夹下面 test