免疫治疗新动向?如何动态观测巨噬细胞的“吞噬”行为?
2017/09/05
(1)用IncuCyte“活细胞动态成像与分析系统”,结合“pHrodo红色细胞标记试剂盒”观察动态活细胞吞噬实验; (2)证实抗CD47抗体作为潜在新型免疫治疗药物,可介导巨噬细胞对癌细胞的吞噬。

一、前言 

最近,美国FDA已批准诺华的CAR-T疗法Kymriah上市,癌症的免疫治疗前景广阔。但目前绝大多数免疫治疗的方向还是集中在T细胞调控上:或通过T细胞基因编辑,如CAR-T治疗;或通过免疫检查点抑制,恢复T细胞对癌细胞的杀伤能力,Kymriah的上市和最近取得的临床成功案例,极大地支持了该领域的研究。然而,我们还可以从许多其他的方向研究免疫细胞及其功能。比如:最近巨噬细胞在肿瘤细胞清除方面的功能和应用受到了很大关注。

 

二、讲座简介 

本讲座讲述了用IncuCyte“活细胞动态成像与分析系统”,结合IncuCyte“pHrodo红色细胞标记试剂盒”观察动态活细胞吞噬实验,包括细胞标记的原理、药物对“吞噬实验”的影响、实验验证及补充的表型实验。证实抗CD47抗体作为潜在新型免疫治疗药物,可介导巨噬细胞对癌细胞的吞噬。

讲座标题

 

三、实验原理 

IncuCyte“pHrodo红色细胞标记试剂盒”可以将目标细胞标记上pH敏感的探针,当这些细胞在培养基中时,探针没有荧光产生。但当他们被吞噬细胞吞噬后,就进入了pH更低的吞噬溶酶体,可明显增加探针的荧光。右侧的视频显示:较大的伸长的巨噬细胞正在吞噬较小的目标细胞,目标细胞被吞噬后,巨噬细胞内的红色荧光就加强,内置于培养箱的“IncuCyte活细胞动态成像与分析系统”会检测发出红色荧光的细胞的数量,对细胞吞噬过程进行动态的成像与数据分析。

“吞噬实验”作用原理

 

四、实验结果

抗CD47抗体介导的“细胞吞噬”图像

 

抗CD47抗体介导的“细胞吞噬”过程中,荧光对象随时间变化的曲线

 

“细胞吞噬”的定量:4种药物对“吞噬作用”的抑制

 

五、自动化的活细胞动态分析  

目前,大部分的细胞检测方法仍然属于传统的终点法——仅仅给出最终结果,这种方法不仅无法对细胞实验的全过程做出动态的监测和分析,还可能得到有偏差的结果。为了能够全程的观测活细胞,美国Essen公司开发了内置于培养箱的IncuCyte“活细胞动态成像与分析系统”,在培养箱内部,同时对6块细胞培养皿/瓶/微孔板(6-384孔)进行长时间的动态成像,记录细胞形态细节的实时改变,并通过功能强大的图像分析软件转化为多种细胞功能相关的时间定量曲线。

 

IncuCyte S3

 

IncuCyte是细胞水平的科研与药物筛选解决方案,已用于免疫肿瘤杀伤、神经生长及退行、癌细胞转移、细胞迁移、干细胞分化、细胞凋亡、细胞坏死、细胞增殖、伤口修复等应用的大规模筛选与长时程生命科学问题的研究。

 

六、在线讲座视频    

视频时长27min,请在WiFi条件下观看:

https://v.qq.com/x/page/k0538aoejcj.html

 

七、关于“典奥生物”  

“典奥生物”(上海、香港、台湾)成立于1994年,二十多年来一直坚持以国际一流仪器生产商为背景,具有丰富研发经验的专家为技术支持,专业的维修团队为服务后盾,专注于为生命科学、医药研发和疾病治疗领域,提供最先进的软硬件设备和技术服务。 

“典奥生物”独家总代理的仪器有:

IncuCyte、Beacon、Gyrolab、iQue Screener、Avatar、PlexBio、Certus、HighRes等。

 

八、联系方式   

“上海典奥生物科技有限公司”

网址:www.tekontech.com

电话:021-58605185(转市场部)

Email:marketing@tekon.com.cn

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