【Nature子刊】CRISPR重要成果:抗体制备将迎来变革
生物通/叶予 · 2016/03/15
日前,哈佛医学院的研究团队将CRISPR-Cas9用到了新的地方。他们利用这一系统成功编辑了小鼠和人类的免疫球蛋白基因。这项研究发表在三月九日的Nature Communications杂志上。


CRISPR-Cas9原本是细菌在漫长的进化史中演化出的重要防御机制。规律成簇的间隔短回文重复CRISPR与内切酶Cas9的组合,可以在引导RNA的指引下,靶标并切割入侵者的遗传物质。 2012年研究者们利用这一特点,将CRISPR系统发展成了强大的基因组编辑工具。现在CRISPR-Cas9基因组编辑系统的应用延伸到了基因敲除、删除、染色体重排、RNA编辑、全基因组筛选等众多领域。

日前,哈佛医学院的研究团队将CRISPR-Cas9用到了新的地方。他们利用这一系统成功编辑了小鼠和人类的免疫球蛋白基因。这项研究发表在三月九日的Nature Communications杂志上。

免疫球蛋白的类别转换重组(CSR)发生在淋巴滤泡的生发中心。成熟B细胞在活化之后可以通过这种机制生产不同类型的抗体。研究人员把Cas9和引导RNA(gRNA)包装在逆转录病毒或慢病毒中,将其送入IgM+小鼠B细胞和杂交瘤,促使IgH(免疫球蛋白重链)发生类别转换重组。这种方法也可以在人类B细胞系中诱导CSR,实现特定IgH亚类的定向生成。除此之外,研究人员还通过CRISPR-Cas9改造了小鼠杂交瘤,使其分泌Fab片段而不是完整Ig。

这项研究表明,对小鼠和人类细胞的Ig基因进行编辑,可以获得人们想要的IgH转换。这一技术不仅有助于正常和淋巴瘤B细胞的生物学研究,还可能为抗体生产领域带来一场革

所有文章仅代表作者观点,不代表本站立场。如若转载请联系原作者。
查看更多
  • Editing of mouse and human immunoglobulin genes by CRISPR-Cas9 system

    Applications of the CRISPR-Cas9 system to edit the genome have widely expanded to include DNA gene knock-out, deletions, chromosomal rearrangements, RNA editing and genome-wide screenings. Here we show the application of CRISPR-Cas9 technology to edit the mouse and human immunoglobulin (Ig) genes. By delivering Cas9 and guide-RNA (gRNA) with retro- or lenti-virus to IgM+ mouse B cells and hybridomas, we induce class-switch recombination (CSR) of the IgH chain to the desired subclass. Similarly, we induce CSR in all human B cell lines tested with high efficiency to targeted IgH subclass. Finally, we engineer mouse hybridomas to secrete Fab′ fragments instead of the whole Ig. Our results indicate that Ig genes in mouse and human cells can be edited to obtain any desired IgH switching helpful to study the biology of normal and lymphoma B cells. We also propose applications that could transform the technology of antibody production.

    展开 收起
发表评论 我在frontend\modules\comment\widgets\views\文件夹下面 test