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2 月冷泉港 5 大热门实验技术

2016/02/20 来源:生物学霸
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导读
今天带给大家的是冷泉港二月期刊推出的最新实验技术:CRISPR–Cas9 技术构建转基因鼠转座子名片技术,分子梳技术在酵母菌染色体 DNA 复制中的应用,如何检测秀丽隐杆线虫自噬和肿瘤迁移实验论最新突破。

今天带给大家的是冷泉港二月期刊推出的最新实验技术,一共有 五个:

CRISPR–Cas9 技术构建转基因鼠

Editing the Mouse Genome Using the CRISPR–Cas9 System


先用细菌举例给你解释一下啥叫基因编辑,比如我想让细菌给我产一个蛋白,但是他不听话,所以我只好人工地敲掉一些基因,然后再额外给他一些基因,他就能按我的要求产蛋白了。放在小鼠身上,也是一样的,我想把小白鼠变成小黑鼠,那就该敲的敲,接着把控制颜色的基因导进去。

那么这和 CRISPR–Cas9 技术有啥关系呢?简单地说,以前我们没法很好实现,因为传统的技术费时费力还没那么精确。而 CRISPR–Cas9 系统可以在不到一个月的时间内,就能将设想付诸于动物模型上。这项技术的灵魂人物是年仅 31 岁的牛逼人物——张峰。

转座子名片技术

Transposon Calling Cards


酵母菌是基因工程界的网红,他体内的基因如何调控对我们研究很重要。要理解转录基因如何调控,识别转录因子靶基因很重要。于是科学家开发了一种名叫转座子「名片」的技术。

该技术的原理是,通过利用转录因子调控 Ty5 复古转录酶(Ty5 retrotransposase)将转座子插入与转录因子结合位点相邻的基因中。

分子梳技术在酵母菌染色体 DNA 复制中的应用

Single-Molecule Analysis of Replicating Yeast Chromosomes


先回顾一下高中生物知识,在讲 DNA 半保留复制时,原核生物和真核生物有何共同点、不同点。比如都有复制起始点、都有复制叉。真核生物 DNA 复制要更复杂。

真核生物染色体 DNA 的复制发生在每个细胞周的 S 期。在复制叉双向移动的特定结构(称为起点)中,复制是受高度调节的和启动的。复制是如何调节的呢?有哪些特征呢?于是就有了染色体复制动力学,也就有了一些技术。

宏观水平的复制视角,例如基于流式细胞术、基于二维和凝胶电泳。后来在 50 年前,DNA 纤维分析法,在单个 DNA 纤维水平上揭示 DNA 复制特性。再到最近的 DNA 分子梳技术,该技术已经成功的应用在出芽酵母菌上,用来监测复制叉发展进程以及起始点的用途。

想想都觉得好牛,这些东西我只在书本里背过,还记不清楚,伟大的科学家却监测了这个过程。

如何检测秀丽隐杆线虫自噬?

Detection of Autophagy in Caenorhabditis elegans


通俗地说,自噬就是细胞自己把自己给分解了。靠的是什么呢?溶酶体。谁喜欢干这事?秀丽隐杆线虫、酵母等。好好地干嘛自噬呢?因为生命过程正常进行需要。怎么识别呢?有种技术叫 RNA干扰(RNAi),还有染色体突变导致的基因失活。

不太懂?详细看看最新刊文,阐述了自噬在部分过程中的作用,同时提供了一些有关秀丽隐杆线虫自噬研究的方法。值得注意的是,本文总结了自噬是如何在胚胎、幼体、成体中形成的,如何通过 western blot 检测泛素类修饰因子 LGG-1 的脂化检测,以及如何通过RNAi抑制自噬基因。

肿瘤迁移实验论最新突破

Methods to Study Metastasis in Genetically Modified Mice


肿瘤细胞脾气比较大,一般药物不好控制,怎么办呢?要想打入他先了解他。于是就有了肿瘤迁移模型。可以这样来理解这个模型,找一只免疫缺陷的老鼠,再把肿瘤细胞这种外来物种移植。然后就可以开始研究。

最新刊文详细阐述了一种在转基因小鼠肿瘤迁移研究方面完整的方法论,并以肺癌为例子,详细阐述了如何利用携带有强人致癌基因表达调控的动物模型来进行研究。

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