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福尔马林:保存标本,帮助DNA和RNA的提取

2014/12/23 来源:千人智库
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导读
乙醇和福尔马林是常见的标本固定液,可以帮助多个学科进行保存回收。福尔马林的功效如何?

在历史上人们使用了各种固定液(各种浓度的乙醇和福尔马林,目前公认的固定液是10%的中性福尔马林溶液)。马尔福林基本的固定能力是通过蛋白质交联,从而使固定物质更加牢固。福尔马林还可以作为适合基因组研究的培养基,比如DNA和RNA的提取研究。

DNA和RNA的恢复,对于许多科学领域和医学专业都非常重要。尽管常常不采取化学固定保存回收的标本,但美国印第安纳大学医学院Shannon Cook等学者这项研究仍可以作为年代久远、未做防腐的标本核基因组材料回收的基本准则。学者大致研究了从1920年至2000年的标本,评估了这些样本中肾脏、肝脏、心脏、肺、脾、子宫和大脑等各种器官的标本。文章发表在科研出版社英文期刊《Forensic Medicine and Anatomy Research》(法医学与解剖学研究)上。

大体上,所有器官都看起来完好,在组织内仍可看到病变状况(出血、坏死、炎症和肿瘤)。先前对FFPE组织的DNA提取结果也纳入了当前这项研究。组织处理、载玻片评价和分子分析的试验方法请点击原文链接查看。

研究是为了寻求储存在福尔马林里的标本,能够进行DNA和RNA提取的“合理时间”。虽然脂质和蛋白质基础结构存在差异,但学者发现保存时间大约超过50年,就很少或几乎没有细胞核了,因此提取DNA和RNA的可能性非常低。除了存储时间长短、固定标本的生物构成影响了提取的成功,标本的大小、组织缺氧的时间和固定液的化学成分也是影响因素。

在1960年以后收集的上述组织中,多数的细胞核、细胞质和细胞膜保存完好。一般而言,1960年以前收集的组织细胞结构,会随着细胞核、细胞质和细胞膜被破坏而降解。在肾、肝、肺、脾、脑部,这些变化特征比心脏和子宫的情况更严重。

原文链接http://www.scirp.org/journal/PaperInformation.aspx?PaperID=52307

备注:本文由刘静竹编译,本文版权属于科研出版社,转载请注明出处。

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