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急速裂解法去除红细胞

2011/01/05 来源:武汉原生原代生物医药科技有限公司网站
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导读
急速裂解法去除红细胞 器材和试剂: 所有直接接触细胞的用品和试剂必须无菌。 1. 标注体积刻度的试管(圆锥形底); 2. 巴斯德吸管(短型和长型); 3. 台式离心机; 4. 培养级纯净水; 5. 2×Hanks平衡盐溶液; 6. 储存培养基,含10%血清; 实

急速裂解法去除红细胞

器材和试剂:

所有直接接触细胞的用品和试剂必须无菌。

1. 标注体积刻度的试管(圆锥形底);

2. 巴斯德吸管(短型和长型);

3. 台式离心机;

4. 培养级纯净水;

5. 2×Hanks平衡盐溶液;

6. 储存培养基,含10%血清;

实验方法:

1. 1000r/min离心原代细胞悬液5min,弃上清;

2. 向细胞沉淀中加入10ml培养级水,并用移液管轻轻来回吹打数次以重悬细胞(注:不同细胞的抗低张能力不同,控制暴露时间低于15s);

3. 迅速加入等体积的2×Hanks平衡盐溶液恢复张力,用巴斯德吸管轻轻混匀细胞悬液;

4. 再次1000r/min离心5min,检查红细胞沉淀。如果红细胞仍大量存在,重复该步骤。否则在储存培养基中重悬洗涤过的细胞;

5. 计数及检测细胞活力后,放培养箱培养;

来源:武汉原生原代生物医药科技有限公司

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