从噬菌体展示技术开始说一说全人源化抗体库研究进展
义翘神州 · 2020/09/04
如何提高抗体筛选效率?

噬菌体展示技术(PDA)由诺贝尔化学奖获得者George Smith创建,目前利用该技术进入临床试验的抗体已超过80种。PDA技术实现可变重链和轻链抗体库的组合配对,在噬菌体表面与外壳蛋白融合的表达,是分离重组单抗的优势技术。

噬菌体展示技术可以根据需要定制条件和选择压力,能够承受高温、pH值、变性剂、紫外线等极端条件,并且有更多的控制选择过程。PDA能够识别靶向抗原的结合物,而忽略抗原的免疫原性,可以直接从现有文库开始筛选抗体。

噬菌体展示技术提供了设计和操作抗体库基因的可能,能用于开发针对半抗原的抗体。独特的优势使其在单克隆抗体研发和生产中会越来越受到重视。单克隆抗体经历了鼠抗、嵌合抗体、人源化抗体、全人源化抗体的过程,促进了抗体药物的广泛应用。

全人源化抗体是最理想的抗体,能够减少人抗鼠抗体(HAMA)反应,降低抗体的免疫原性,完全避免鼠源性单抗的缺点。目前,全人源化抗体主要通过抗体库技术筛选实现,其中最重要的就是噬菌体展示技术。

全人源抗体库是基因组学和蛋白质组学结合发展的技术,不需要动物免疫就可以进行抗体筛选。研究从人的免疫细胞开始,利用分子生物学技术实现抗体轻链、重链基因的多次重组,得到大库容量的抗体文库,再经过抗原靶点高通量筛选,建立大规模的抗体库,最终筛选出特异性抗体。

抗体库技术在抗体筛选过程中具有明显的优势,库容量可达109、抗体种类多、更容易获得靶向特定抗原表位的高活性单克隆抗体等。噬菌体抗体库技术能够用于制备杂交瘤技术难以生产的抗体,能够筛选具有催化或切割功能的抗体酶,并且从天然抗体库中筛选出很多抗半抗原、蛋白质、多糖和病毒粒子的抗体。

人源化抗体库用于多种研究领域。在肿瘤诊断和抗体药物研发方面备受重视,抗体库技术能高效地筛选肿瘤细胞表达的特异性分子标志物,还可利用肿瘤相关抗原或特异性抗原筛选与肿瘤表面相关抗原结合的特异性抗体。在病原微生物方面也独居特色,已有多种新冠病毒中和抗体从抗体库中筛选成功,促进人们对疾病预防、诊断、治疗及疫苗的研发。抗体库技术还能够提高抗体亲和力、降低免疫原性等。

人源化抗体库展示技术的流程是一环扣一环的,每一个步骤都不容小觑。那么,如何提高抗体筛选效率?对于引物设计和抗体库扩增有哪些需要注意的呢?诸如连接温度、连接时间、连接产物的用量、转化细菌的选择等细节,该有哪些可供参考的呢?对于这些问题,9月15日19:30,毕业于荷兰代尔夫特理工大学的任为老师将与大家分享:“全人源抗体库技术平台及案例分析”的免费在线讲座,扫描下方二维码即可立即报名!


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